养肝软坚方抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探讨中药复方养肝软坚方对四氯化碳（CCl4）诱导的实验大鼠肝纤维化的治疗作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为：正常对照组、模型组及治疗组,除正常对照组外所有大鼠均给予皮下注射40%CCl4（每3天1次,共11周）。造模3周后治疗组大鼠给予养肝软坚方10ml.kg-1.d-1,正常对照组及模型组大鼠给予等量生理盐水,1次/d,共8周。实验结束时检测大鼠肝功能、血清透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和肝脏羟脯氨酸（Hyp）,采用光镜观察肝脏病理组织学改变。结果：养肝软坚方能改善肝纤维化大鼠的肝功能,可显著降低血清HA、LN、PCⅢ水平和肝组织中过高的Hyp,病理组织学观察表明其能显著改善肝纤维化程度。结论：养肝软坚方对CCl4诱导的大鼠具有较好的抗肝纤维化作用。     

补肾方药对老年大鼠血清皮质酮含量、LTP及空间学习记忆能力的影响

目的 观察补肾方药(左归丸、右归丸)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)及空间学习记忆能力的影响.方法 以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年皮质酮(GC)拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设青年对照组.采用ELISA法检测大鼠血清皮质酮含量,Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,电生理方法记录在体大鼠LTP变化;同时观察补肾方药对上述指标异常变化的改善作用.结果 与青年对照组相比,老年对照组大鼠的血清皮质酮含量明显升高(P＜0.05),空间学习记忆能力显著下降,海马CA1区LTP明显受到抑制(P＜0.05);补肾方药左归丸、右归丸能不同程度地改善上述指标的异常变化.结论 补肾方药左归丸、右归丸改善老年大鼠空间学习记忆能力的机制之一可能与拮抗高皮质酮对老年大鼠空间学习记忆的损伤有关,其余相关分子机制有待进一步研究.     

鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化的防治作用

目的:研究鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的防治作用及对TGF-β1和Sman3/7蛋白表达的影响,探讨其机制.方法:SD♂大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A组),其余大鼠用皮下注射40%CCl4橄榄油油剂3mL/kg诱导大鼠肝纤维化模型8wk,于第2周时随机处死5只大鼠证实HF形成后,将剩下的大鼠随机分为肝纤维化模型组(B组)、鳖甲煎改良方高剂量组[C组,28.4g/(kg·d)]、中剂量组[D组,14.2g/(kg·d)]、低剂量组[E组,7.1g/(kg·d)]、复方鳖甲软肝片组[F组,0.6g/(kg·d)],每组15只.C、D、E、F组给予10mL/(kg·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理.8wk后采血测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、草氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白和球蛋白含量;取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化;Westernblot方法检测TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的表达.结果:8wk后,与B组比较,C、D、E组和F组肝小叶结构破坏明显减轻,肝纤维化程度分级较B组明显好转;ALT和AST含量显著降低(P<0.01),白蛋白含量显著增...     

祛风通络方对系膜增生性肾小球肾炎大鼠蛋白尿及血清IL-6与IL-8的影响

目的：探讨祛风通络方对系膜增生性肾小球肾炎大鼠蛋白尿及血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）的影响。方法：采用免疫法制备系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型,应用磺柳酸法测定大鼠24h尿蛋白定量,双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清IL-6、IL-8,光镜下观察各组大鼠肾小球系膜区（GMC）及细胞外基质（ECM）积聚变化。结果：模型组与正常对照组比较24h尿蛋白定量及血清IL-6、IL-8明显升高（P〈0.01）;祛风通络方组24h尿蛋白定量及血清IL-6、IL-8均明显低于模型组（P〈0.01）;肾组织形态学观察显示祛风通络方组个别区域肾小球系膜细胞轻度增生,系膜区轻度增宽,管腔无挤压现象,较模型组明显改善。结论：祛风通络方组降低系膜增生性肾小球肾炎大鼠尿蛋白,降低血清IL-6、IL-8水平,减轻系膜细胞增生和细胞外基质增加,延缓或减轻肾组织损伤,保护肾功能。     

益气活血方对进展性脑梗死临床疗效及对血清黏附因子的影响

目的观察益气活血方对进展性脑梗死患者血清黏附因子变化及临床疗效的影响。方法将60例入选进展性脑梗死病例随机分成治疗组和对照组,对照组按西医常规治疗,治疗组按西医常规治疗并加服益气活血方,2周后观察患者血清ICAM-1及VCAM-1表达水平变化,并评估患者中医临床证候积分,神经功能缺损积分及生活质量积分,分析评价疗效。结果治疗后2组患者神经功能缺损积分、生活质量积分及中医证候积分均有明显好转(Ρ<0.01),且治疗组优于对照组(Ρ<0.05)。治疗后2组患者血清ICAM-1及VCAM-1含量均有降低(Ρ<0.01),且治疗组降低更明显(Ρ<0.05)。结论益气活血方能明显改善进展性脑梗死患者的神经功能及生活质量,提高临床疗效,提示益气活血方可能通过降低血清黏附因子水平治疗进展性脑梗死。     

应用全基因组拷贝数变异方法探索参芪膜肾方治疗特发膜性肾病基因水平机制的研究

目的：探索特发膜性肾病患者全基因组拷贝数变异与参芪膜肾方疗效的关系。方法：选取80例经参芪膜肾方或经典的激素联合环磷酰胺方案治疗后完全缓解和无效的IMN病例,分为中药有效组（36例）、中药无效组（11例）、西药有效组（18例）和西药无效组（15例）。提取外周血基因组DNA并应用Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array 6.0芯片检测全基因组基因拷贝数,应用CNVhac软件进行拷贝数变异（ CNV）分析。结果：中药有效组与中药无效组在第5、第6及第8染色体上检测到的CNVs差异具有统计学意义（P＜0.05）。其中位于6号染色体上的HLA族基因在中药有效组多数病例中表现为拷贝数扩增,而中药无效组的多数病例则表现为拷贝数缺失。西药有效组与西药无效组之间未检测到具有统计学差异的CNVs。结论：基因背景差异可能是导致参芪膜肾方取得不同疗效的基因水平机制,HLA的同族基因拷贝数变异影响参芪膜肾方疗效的发挥,前者有望成为该方治疗IMN的疗效预测因子,值得进一步深入研究。     

温肾活血方对RCS大鼠视网膜感光细胞凋亡的影响

目的观察温肾活血方对RCS大鼠视网膜感光细胞凋亡的影响。方法纯合子RCS大鼠16只在出生后14 d随机分为2组,即模型组、治疗组,每组8只,另8只SD大鼠作为正常对照组。治疗组予温肾活血方灌胃治疗,而模型组及对照组予蒸馏水灌胃治疗,连续治疗28 d。HE染色观察视网膜各层细胞形态和结构的变化,TUNEL荧光染色观察视网膜外核层细胞凋亡情况。免疫组化荧光染色测定视网膜Caspase-3,Bax,Bcl-2的表达。结果(1)HE染色:治疗后28 d,RCS大鼠各组视网膜外核层较对照组明显变薄,感光细胞数量明显减少,但治疗组较模型组视网膜更厚,感光细胞数更多。(2)TUNEL检测:治疗后28 d,RCS大鼠各组视网膜外核层凋亡细胞计数较对照组明显增多,3组间比较差异有显著统计学意义(F=71.58,P=0.000);与模型组比较,治疗组凋亡细胞计数显著减少(t=4.74,P=0.001)。(3)免疫组化:治疗后28 d,3组间比较,视网膜Caspase-3(F=59.37,P=0.000)、Bcl-2(F=31.35,P=0.000)表达水平差异有统计学意义;与模型组比较,治疗组Caspase-3表达显著减少(t=2.36,P=0.040),Bcl-2表达显著增多(t=3.15,P=0.010),均有统计学意义。结论温肾活血方可以抑制RCS大鼠视网膜感光细胞凋亡,其作用可能与抑制Caspase-3的表达并促进Bcl-2的表达有关。     

中西医结合疗法对巧囊术后慢性盆腔痛及复发的影响

目的:基于治未病理论观察中药多途径疗法联合戈舍瑞林对巧囊术后慢性盆腔痛及复发的影响。方法:将80例巧囊术后患者随机分为两组各40例。对照组予散结镇痛胶囊联合戈舍瑞林治疗,治疗组予清热化瘀方口服、保留灌肠及离子导入联合戈舍瑞林治疗。治疗3个月后,比较两组临床疗效、慢性盆腔痛程度(VAS评分)及血清TNF-α、IL-6、VEGF水平变化情况,并随访1年,比较两组的妊娠情况。结果:治疗组总有效率97.50%高于对照组75.00%(P<0.05)。治疗后,两组慢性盆腔痛VAS评分及TNF-α、IL-6、VEGF水平均低于治疗前(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。随访1年,治疗组妊娠结局优于对照组(P<0.05)。结论:基于治未病理论采用中药多途径疗法联合戈舍瑞林治疗巧囊术后患者,可有效提高临床疗效,减轻慢性盆腔痛的发生,抑制巧囊的复发,增加有生育要求患者的妊娠率。     

射麻止喘方联合孟鲁司特钠治疗支气管哮喘疗效研究

目的:研究射麻止喘方联合孟鲁斯特钠治疗支气管哮喘的疗效。方法:将118例患者按随机数字表法分为对照组59例和观察组59例。对照组给予孟鲁斯特钠治疗,观察组给予射麻止喘方联合孟鲁斯特钠治疗。进行治疗前后哮喘控制调查问卷(ACT)评分、支气管哮喘生活质量问卷(AQLQ)评分; 检测治疗前后肺功能指标、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-25(IL-25)水平; 并统计两组临床治疗总有效率。结果:治疗后观察组总有效率优于对照组(χ²=4.196,P<0.05); 与治疗前相比较,两组喘息、咳嗽、咳痰、胸闷及哮鸣音积分较治疗前下降(均P<0.05),治疗后组间比较发现,观察组中医症状、体征积分低于对照组(均P<0.05); 与治疗前相比较,两组第1秒用力呼气容积(FEV₁)、呼气流量峰值(PEF)水平较治疗前上升(均P<0.05),治疗后组间比较发现,观察组FEV₁、PEF水平高于对照组(均P<0.05); 与治疗前相比较,两组IL-4、IL-10、IL-18、IL-25水平较治疗前下降(均P<0.05),治疗后组间比较发现,观察组IL-4、IL-10、IL-18、IL-25水平低于对照组(均P<0.05); 与治疗前相比较,两组ACT评分、AQLQ评分较治疗前上升(均P<0.05),治疗后组间比较发现,观察组ACT评分、AQLQ评分高于对照组(均P<0.05)。结论:在孟鲁斯特钠治疗基础上,内服射麻止喘方治疗支气管哮喘可减轻炎症反应,缓解临床症状,提高生活质量和临床疗效。     

藿苓益智方对阿尔茨海默病模型小鼠神经细胞凋亡线粒体通路的作用研究

目的:探讨藿苓益智方对阿尔茨海默病线粒体通路神经细胞凋亡的调控作用。方法:采用Aβ的活性片段Aβ_25-35诱导PC12细胞凋亡建立阿尔茨海默病的细胞模型。本实验设置六个组,即对照组、Aβ_25-35组、Aβ_25-35+盐酸多奈哌齐组、Aβ_25-35+藿苓益智方提取物(50、100、200 μg/ml)组。利用流式细胞仪、荧光酶标仪和透射电镜等技术,检测霍苓益智方提取物对阿尔茨海默病细胞模型中细胞存活率、神经细胞凋亡率、线粒体超微结构的变化。结果:藿苓益智方提取物50 μg/ml组的细胞存活率与Aβ_25-35组相比有一定的增高(P<0.05); 盐酸多奈哌齐组和藿苓益智方提取物(100、200 μg/ml)组与Aβ_25-35组相比,细胞存活率显著升高(均P<0.01),但藿苓益智方提取物200 μg/ml组升高的更明显; 藿苓益智方低、中、高剂量+A_25-35组细胞凋亡率则逐步下降,其中中、高剂量组与Aβ_25-35组相较差异均具有统计学意义(均P<0.01); 藿苓益智方低、中、高剂量+Aβ_25-35组对细胞核的损害程度上,经治疗以后逐步缓解,且呈剂量依赖性趋势。结论:藿苓益智方对阿尔茨海默病的治疗中可对Aβ诱导的PC12细胞凋亡具有明显的抑制作用,改善细胞存活率,减少线粒体细胞凋亡。